МУК 4.1.0.513-96 Измерение концентраций рубомицина и доксорубицина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны

ГОСУДАРСТВЕННОЕ САНИТАРНО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОЕ НОРМИРОВАНИЕ
РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

4 .1 . МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ ВРЕДНЫХ ВЕЩЕСТВ
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ РУБОМИЦИНА И
ДОКСОРУБИЦИНА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ
ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

МУК 4.1.0.513-96

МИНЗДРАВ РОССИИ

Москва 2003

1 . Методические указания разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (П ДК ) и ориентировочно безопасным уровням воздействия, санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осущ ествлении санитарного контроля.

2 . Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (выпуск 34) утверждены и. о. председателя Госко м санэпиднад зора России, заместителем Главного Государственного санитарного врача Российской Федерации Беляевым Е. Н. 8 июня 19 96 г.

3 . Введены впервые.

4 . Включенные в данный выпуск методики контроля разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования», ГОСТ 12.1.016-79 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Требования к методикам контроля измерения концен т раций вредных веществ», ГОСТ Р 1.5-92 п. 7.3, ГОСТ 8.010-90 «Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений». Методические указания одобрены комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Госко м сан эп иднад зора России и Проблемной комиссией «Научные основы гигиены труда и профпато логии» .

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (выпуск 34) предназначены для центров Госкомсанэпиднадзора , санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также заинтересованных министерств и ведомств.

Ответственный исполнитель: Г. А. Дьякова

Исполнители: Г. А. Дьякова, Л. Г. Макеева , Е. М. Мал инина, С. М. Попова, Е. Н. Грицу н, Т. В. Рязанцева, Г. Ф. Громова.

УТВЕРЖДЕНО

И. о. Председателя

Госкомсанэпиднадзора России –

заместитель Главного государственного

санитарного врача Российской Федерации

Е. Н. Беляев

8 июня 1996 г.

МУК 4.1.0.513 -9 6

Дата введения: с момента утверждения

4. 1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ РУБОМИЦИНА И
ДОКСОРУБИЦИНА МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ
ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

М. м. 563,7

Р у бо мици н (двун омицин ) - { 8-ац етил -10[(3-амин о- 2,3,6-т рид ео кси- L - ликсо -г ексап иран озил )ок си-7,8,9,10 -т ет рагид ро- 6,8,11 -т ригид ро кси-1 -мето кси-5,1 2-нафтиц енди он]} - кристаллическое вещество красного цвета. Хорошо растворим в воде, водных растворах минеральных кислот. Растворим в метиловом и этиловом спиртах. Ограниченно растворим в ац етонит рил е. Не растворим в хлороформе. Температура плавления - 184-18 6 ° С.

М . м. 560,0

До к сорубицин (адриамицин, 1 4-гидроксирубомицин) - { 10-/3-амино-2,3 ,6-тридеок си- L -ликсогексопиранозил)окси/-7 ,8 ,9,10 -тетрагидро-6,9,11-тригидрокси-8-(гидроксиацетил)-1 -метокси-5,12 -нафтицендион} - кристаллическое вещество красного цвета. Хорошо растворим в воде, водных растворах минеральных кислот. Растворим в метиловом и этиловом спиртах. Ограниченно растворим в ацетонитриле. Не растворим в хлороформе. Температура плавления - 185-18 6 °С.

В воздухе находятся в виде аэрозолей.

В связи с широкой общетоксической, аллергенной, канцерогенной, мутагенной и тератогенной опасностью П ДК на рубомици н и доксорубици н не устанавливается. Рекомендуется исключить все виды контактов.

Характеристика метода

Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб производится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения рубомицина и доксорубицина в хром а тогр афируемом объеме пробы - 0,01 25 мкг.

Нижний предел измерения концентрации рубомицина и доксорубицина в воздухе - 0,00 01 мг/м3 (при отборе 500 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций в воздухе - от 0,0001 до 0,001 мг/м 3 .

Определению не мешает присутствие дибиомицина, доксици кл ина т озилата, мешает присутствие хлорметапиклина тозилата.

Суммарная погрешность измерения не превышает ±25 % .

Время выполнения анализа , включая отбор пробы, - около 80 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Мик рокл оночны й жидкостной хроматограф «Мили хром» или другие модели с УФ -дет екто ром

Хр о матог рафи ческ ая колонка длиной 120 мм, внутренним диаметром 2 мм, заполненная сорбентом « Сил асо рб G N » с размером зерен 7,0 мкм (Чехия)

Электроаспиратор ЭА- 1

ОСТ 95.1 0052-8 4

Ф ильт родержатель

ТУ 95.720 5-7 7

Роторный испаритель

ТУ 2 5-11-917-7 4

Колбы грушевидные для вакуумной разгонки, вместимостью 1 0-1 5 мл

ГОСТ 973 7-7 0

Микроскоп о тс четны й типа МП Б- 2

ТУ 3-3-8 24-7 8

Стеклянная ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмов о е число 5 (или другая такого же типа)

Колбы мерные, вместимостью 25 ,1 00 мл и 1 л

ГОСТ 1770-74

Пипетки вместимостью 10 мл

ГОСТ 20292-74

Пробирки с пришлифованными пробками, вместимостью 10 мл

ГОСТ 10515-7 5

Фильтры АФА-ВП- 10

ТУ 85 -7 43-8 0

Реактивы, растворы и материалы

Ру бо мицин фармакопейный, содержание основного вещества не менее 98 %

Док со ру бицин фармакопейный, содержание основного вещества не менее 98 %

Калий мар г анц ево-ки слы й (калия перманг ан ат)

ТУ 2049 0-7 5

А ц етонит рил очищенный

А ц етонит рил очищенный получают из ац етонит рил а чистого путем ректификации с предварительной химической обработкой, которая заключается в кипячении растворителя с обратным холодильником в присутствии перманг ан ат а калия из расчета 1 г перманг ан ат а калия на 1 л растворителя

ТУ 6-09-3 534-8 2

Кипячение проводится до полного перехода перманганата калия в двуокись м а рг ан ца. Перед ректификацией осадок двуокиси марганца отделяют путем фильтрации через фильтр Шотт а № 4 ректификационная колонна длиной 550 мм и внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из нержавеющей стали (2×2×0,2 мм)

Основную фракцию отбирают п ри температуре 81,6 °С (атмосферное давление) в пределах колебаний ±0,1 °С

Натрий фосфорно- кислы й д ву замещенны й 12 -водны й, Na 2 H PO 4 × Н2 0 (ди нат рийф осфат)

ТУ 4172-7 6

Калий фосфорно-кислый о дн озамещенны й KH 2 Р О4 (калий фосфат)

ТУ 4198-7 5

0,067 М раствора дин ат рийфос фата готовят растворением 23,986 натрия фосфорно-ки слого д ву замещенного 1 2-водн ого в воде в мерной колбе вместимостью 1 л

0,067 М раствора ка л ийфос фат а готовят растворением 9,078 калия фосфорнокислого одн озамещенного в воде в мерной колбе, вместимостью 1 л 0,067 М фосфатный буфер (рН 7,2) готовят, смешивая 720 мл 0,067 М раствор ди нат рийфосфат а и 280 мл 0,067 М раствор калийфосфата

Фосфатный буфер устойчив при хранении в холодильнике в течение месяца

Растворитель: 0,067 М фосфатный буфе р (рН 7,2)

Эл ю ент : 0,067 М фосфатный буфер (рН 7,2)- ац етонит рил , (4,5:1)

Стандартный раствор № 1 с концентрацией р у бо мици на и доксо ру бици на по 500 мкг /мл готовят растворением смеси 0,05 г рубомицина и 0,05 г доксор уб ицин а растворителе в мерной колбе, вместимостью 10 0 мл.

Стандартный раствор № 2 с концентрацией рубомицина и доксорубицина по 10 мкг/мл каждого готовят соответствующим разбавлением с тандартного раствора № 1 растворителем.

Растворы устойчивы при хранении в холодильнике в течение суток.

Отбор пробы воздуха

Воздух с объемным расходом 20 л / мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10 . Для определения 0,0001 мг/м3 рубомицина или доксорубицина достаточно отобрать 500 л воздуха.

Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.

Подготовка к измерению

Хроматографические колонки промышленного изготовления. Количественный анализ проводят методом абсолютной калибровки с использованием г радуи ро вочны х растворов, которые готовят с равными концентрациями рубомицина и доксору бици на от 0,0005 до 0,005 мкг /мкл , путем соответствующего разбавления стандартного раствора № 2 растворителем.

Растворы устойчивы в течение суток при хранении в холодильнике в закрытых сосудах.

Гра ду ировочны е растворы в количестве 25 мкл инжектируют в хроматограф, вводя равные количества рубомицина и доксорубицина.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

Скорость подачи эл ю ент а (0,067 М фосфатный буфер         1 00 мкл /мин

рН 7 ,2- ац ето нит рил , 4 ,5:1)

Длина волны УФ-детектора                                                    2 34 нм

Скорость движения диаграммной ленты,                              1 ,5 мм/мин

Диапазон чувствительности детектора                                  0 ,4-0 8

Диапазон измерения самопишущего потенциометра           5 0 мВ

Объем вводимой пробы                                                          2 5 мкл

Время удерживания рубомицина                                            2 5 мин

доксорубицина                                                                          1 6 мин 3 0 с

Элюирующий объем рубомицина                                          2 500 мкл

доксорубицина                                                                          16 50 мкл

Эффективность колонки по рубомицина                               5 25 тт

доксорубицина                                                                          4 70 тт

На полученной хр о матог рамме измеряют площади пиков и строят г радуир ов оч ные графики, выражающие зависимость площади пиков (мм2) от содерж ания рубомицина или доксорубицина в хро матог рафи руемом объеме (мкг ).

Построение градуировочных графиков необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого

инжектируемого об ъ ема. Проверку г радуи ровочны х графиков следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 5 мл воды и оставляют на 15 мин при комнатной температуре и периодическом перемешивании. Степень десорбции с фильтра и рубомицина и доксоруби ц ина - 98,5 %.

Полученный раствор переносят в предварительно взвешенную грушевидную колбу и упаривают на роторном испарителе под вакуумом при температуре 4 0-4 5 °С досуха. Сухой остаток растворяют в 0,1 мл растворителя.

25 мкл сконцентрированного раствора инжектируют в колонку хроматографа.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тем же элюентам, что и при построении градуировочны х графиков.

Количественное определение содержания рубомицина и доксорубицина в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенным градуировочн ы м графикам.

Расчет концентрации

Концентрацию рубомицина или доксорубицина С в воздухе (в мг/м3) вычисляют по формуле:

, где

а - содержание рубомицина или доксорубицина в хроматографируемом объеме пробы, найденное по соответствующему градуировочному графику, мкг;

б - объем пробы, взятой на хроматографирование, мл;

в - общий объем анализируемого раствора, мл;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к стандартным условиям

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле:

, где

Vt - объем воздуха, отобранный для анализа, л;

Р - барометрическое давление, к Па (101, 33 кПа = 760 мм рт. ст.);

t - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V 20 следует пользоваться таблицей коэффициентов (приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V t на соответствующий коэффициент.

Приложение 2

Коэффициенты для приведения объема воздуха к стандартным условиям

Давление Р, кП а/ мм рт. ст.

° С

97,33/730

97,86/734

98,4/738

98,93/742

99,46/746

100/750

100,53/754

101,06/758

101,33/760

101,86/764

-3 0

1,1582

1,1646

1,1709

1,1772

1,1836

1,1899

1,1963

1,2026

1,2058

1,2122

-2 6

1,1393

1,1456

1,1519

1,1581

1,1644

1, 17 05

1,1768

1,1831

1,1862

1,1925

-2 2

1,1212

1,1274

1,1336

1,1396

1,1458

1,15 1 9

1,1581

1,1 643

1,1673

1,1735

-1 8

1,1036

1,1097

1,1158

1,1218

1,1278

1,1338

1,1399

1,1460

1,1490

1,1551

- 1 4

1,0866

1,0926

1,0986

1,1045

1,1105

1, 11 64

1,1224

1,1284

1,1313

1,1373

-1 0

1,0701

1,0760

1,0819

1,0877

1,0986

1,0994

1,1053

1,1112

1,1141

1,1200

-6

1,0540

1,0599

1,0657

1,0714

1,0772

1,0829

1,0887

1,0945

1,0974

1,1032

-2

1,0385

1,0442

1,0499

1,0556

1,0613

1,0669

1,0726

1,0784

1,0812

1,0869

0

1,0309

1,0366

1,0423

1,0477

1,0535

1,0591

1,0648

1,0705

1,0733

1,0789

+2

1,0234

1,0291

1,0347

1,0402

1,0459

1,0 51 4

1,0571

1,0627

1,0655

1,0712

+6

1,0087

1,0143

1,0198

1,0253

1,0309

1,0363

1,0419

1,0475

1,0502

1,0557

+10

0,9944

0,9999

0,0054

1,0108

1,0162

1,0216

1,0272

1,0353

1,0326

1,0407

+14

0,9806

0,9860

0,9914

0,9967

1,0027

1,0074

1,0128

1,0183

1,0209

1,0263

+18

0,9671

0,9725

0,9778

0,9830

0,9884

0,9936

0,9989

1, 0043

1,0069

1,0122

+20

0,9605

0,9658

0,97 11

0,9783

0,9816

0,9868

0,9921

0,9974

1,0000

1,0053

+22

0,9539

0,9592

0,9645

0,9696

0,9749

0,9800

0,9853

0,9906

0,9932

0,9985

+24

0,9475

0,9527

0,9579

0,9631

0,9683

0,9735

0,9787

0,9839

0,9865

0,9917

+26

0,94 12

0,9464

0,9516

0,9566

0,9618

0,9669

0,9721

0,9773

0,9799

0,9851

+28

0,9349

0,9401

0,9453

0,9503

0,9555

0,9605

0,9657

0,9708

0,9734

0,9785

+30

0,9288

0,9339

0,9391

0,9440

0,9432

0,9542

0,9594

0,9645

0,9670

0,9723

+34

0,9167

0,9218

0,9268

0,9 318

0,9368

0,94 18

0,9468

0,9519

0,9544

0,9595

+38

0,9049

0,9099

0,9149

0,9199

0,9248

0,9297

0,9347

0,9397

0,9421

0,9471

Приложение 3

Вещества, определяемые по ранее утвержденным методическим указаниям

Наименование вещества

Опубликованные методические указания

Гексаметилендиаминадип инат (соль АГ)

Методические указания по хроматографическому измерению концентраций гексаметилендиаммонийсебацината в воздухе рабочей зоны. Вып. XXII., М., 1988. - 8 5 с.

Натрия перкарбонат

Методические указания по фотометрическому измерению концентраций едких щелочей и карбоната натрия в воздухе рабочей зоны, переработанные и дополненные технические условия. Вып. 10. М., 1988. - 4 9 с.

Ванадиевые катализаторы

Методические указания на фотометрическое определение ванадия и его соединений в воздухе. Вып. 1-5 . М., 19 81. - 7 с.

Полисульфоны (П СК-1, ПСФ-КС, ПСФ-15 0-1, П СФ-15 0, ПСФ-200, П СБ- 220, ПСБ- 230, ПСФ-180-1, ПСФ-1 90)

Методические указания на гравиметрическое определение пыли в воздухе рабочей зоны и в системах вентиляционных установках. Вып. 1-5 . М., 1981. - 2 35 с .

Абомин

Методические указания по фотометрическому определению БВК в воздухе. Вып. XVIII . М., 1983. - 1 39 с .

СОДЕРЖАНИЕ

Характеристика метода . 2

Приборы, аппаратура, посуда . 3

Реактивы, растворы и материалы .. 3

Отбор пробы воздуха . 4

Подготовка к измерению .. 4

Проведение измерения . 4

Расчет концентрации . 4

Приложение 1 Приведение объема воздуха к стандартным условиям .. 5

Приложение 2 Коэффициенты для приведения объема воздуха к стандартным условиям .. 5

Приложение 3 Вещества, определяемые по ранее утвержденным методическим указаниям .. 5

Еще бесплатно скачать

Рейтинг:
  • Итоги рейтинга 5.00/5
  • 1
  • 2
  • 3
  • 4
  • 5
5.0/5 (1 голос)

Данную страницу никто не комментировал. Вы можете стать первым.

Ваше имя:
Ваша почта:

RSS
Комментарий:
Введите символы: *
captcha
Обновить